Potencialidades de la microscopía en la investigación del SARS-CoV-2: aislamiento, fisiopatogénesis y dianas terapéuticas

La identificación del amplio tropismo del SARS-CoV-2 puede ser crítico para la patogénesis viral, por lo que es relevante conocer los mecanismos de infección e identificar nuevas dianas terapéuticas. Esta investigación consta de 2 bloques experimentales: aislamiento y caracterización del virus SARS-CoV-2; y patogénesis, tropismo, dianas moleculares y terapéuticas.

Se realizaron los siguientes procederes:

a) De la cavidad nasofaríngea de pacientes positivos al COVID-19, se obtuvieron muestras clínicas que se inocularon en las células Vero E6 y se analizaron mediante microscopía electrónica de barrido a las 72 h postinfección;

b) Se obtuvieron muestras de órganos viscerales de fallecidos por COVID-19: pulmón, hígado, riñón y cerebro. Los criocortes o cortes ultra finos se evaluaron mediante la tinción de tricrómica de masson, microscopía electrónica y la microscopia confocal.

Se obtuvieron los siguientes resultados principales:

a) Se identificó un extenso daño en las células Vero E6 infectadas en las cuales se pudieron observar partículas de virus y viriones extracelulares, evidenciando un efecto citopático;

b) Se identificaron procesos fisiopatológicos: por tinción de tricrómica de Masson, se identificó un predominio de las etapas más avanzadas del daño alveolar difuso. Al microscopio electrónico en pulmón, se evidenció la pérdida abundante de las células epiteliales alveolares. A través de microscopia confocal, se detectó la presencia de la nucleocápside del SARS-CoV-2 colocalizada con las moléculas claves tales como: fibronectina, vimentina, PPARγ conjuntamente con el inflamasoma NLRP3 en tejidos corticales cerebrales.

Lo relevante de esta investigación es que se realizó por primera vez el aislamiento del virus SARS-CoV-2 en Cuba en exudados nasofaríngeos de pacientes con COVID-19 en la línea celular Vero E6. También se pudieron indentificar por primera vez, novedosos procesos celulares y fisiopatológicos involucrados en la infección del virus SARS-CoV-2 y potenciales dianas terapéuticas que revelan fármacos prometedores para combatir la COVID-19 y sus secuelas.

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Falcón-Cama V, Pentón-Rol G, Montero-González T, Acosta-Rivero N, Guillén-Nieto G, Acosta-Medina E, Cremata-García D, Matos-Terrero M, Fernández-Ortega C, Oramas-Díaz L, Mondeja-Rodríguez B, Blanco-Aguila O, Suárez-Batista A, Noa-Romero E, Valdés-Veliz R, Díaz-García A, González-Alfaro Y. Potencialidades de la microscopía en la investigación del SARS-CoV-2: aislamiento, fisiopatogénesis y dianas terapéuticas. Anales de la Academia de Ciencias de Cuba [Internet]. 2023; 13 (3) – pdf, 1.7 MB